无乳链球菌属于B 族链球菌（GBS），是一种人，畜，鱼共患的致病菌。在人体中，主要定植于消化道与生殖道，并通过孕妇产道感染初生婴儿，引起脑膜炎与败血症，其主要的致病菌株为ST-17型。近年来,在水生动物体内也频繁分离到该菌，尤其是自2007年以来，该菌每年都在中国广东、海南、福建、广西等罗非鱼主要养殖区暴发流行，近年来，亦发现水产品中会携带ST-17型链球菌。
CRISPR/Cas是细菌抵御外源DNA的一种机制，在2型CRISSPR干扰下，Cas9具有DNA内切酶活性，在gRNA引导下，水解外源DNA。近年来，越来越多的报道证实Cas9与细菌的毒力，免疫逃避以及宿主病原互作相关。今天给大家介绍的一篇文章，就是探讨Cas9 在GBS致病性及定植中的作用，结果如下：
1、构建ST-17 GBS Cas9缺失株：△cas9株在培养基中生长以及荚膜的产生与野生株无明显差异
2、GBS的感染与在阴道的存活时长与Cas9 相关：COH1△cas9株相对于野生株，穿透脑组织的能力减弱了(Figures 2A,B)。相较于COH1△cas9株，野生株在小鼠阴道中存活数量更多，持续的时间更长(Figure2D)
3、GBS Cas9参与宿主的相互作用：体外用hCMEC细胞模拟人血脑屏障，△cas9株的黏附性与野生株无明显差异，但入侵hCMEC细胞的能力明显降低(Figures3A,B)；体外用hVEC模拟人生殖道环境，△cas9株的黏附性显著降低，但入侵hVEC细胞的能力与野生株无明显差异(Figures3C,D)
4、Cas9 对GBS基因表达的影响：野生株与△cas9株，存在353个基因差异表达，包括双组分系统相关基因，细胞壁形成相关基因。这些结果通过RT-PCR进行验证，表明Cas9 可以显著性的调控GBS一些基因的表达
5、CiaR 双组分系统调控因子，在△cas9株中显著下调
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